Tra le disposizioni di maggior rilievo del provvedimento, in vigore dal 01/01/2019, si segnalano le seguenti:

- Estensione del regime forfetario agevolato per i c.d. "contribuenti minimi";
- Imposta sostitutiva per imprenditori individuali ed esercenti arti e professioni;
- Cedolare secca sulle locazioni di immobili commerciali;
- Proroga e rimodulazione dell’iperammortamento "Industria 4.0"; 
- Proroga delle detrazioni fiscali per interventi di efficienza energetica, ristrutturazione edilizia, acquisto di mobili, sistemazione a verde;
- Proroga della possibilità di rivalutare i terreni edificabili e agricoli e le partecipazioni non negoziate;
- Limiti acquisti di beni e servizi con Mercato elettronico della PA - MEPA; 
- Contributi per la messa in sicurezza di edifici e territorio;  
- Struttura per la progettazione di beni ed edifici pubblici;
- Riqualificazione energetica immobili della P.A.;
- Proroga concessioni demaniali marittime in essere;
- Concessioni demaniali marittime con uso di manufatti amovibili;
- Ampliamento soglia affidamenti diretti stazioni appaltanti;
- Incentivi impianti a biogas.

Il Decreto è in vigore dal 08/04/2025.

Il provvedimento approva il nuovo Testo Unico sulla sicurezza sul lavoro, che attua la delega conferita al Governo dalla L. 123/2007.
Il testo entra in vigore dal 15/05/2008, ad eccezione delle seguenti disposizioni:

- la valutazione dei rischi, di cui agli articoli 17, comma 1, lettera a), e 28, nonché le altre disposizioni che ad esse rinviano, efficaci a partire dal 29/07/2008;
- il titolo VIII, capo IV - Protezione dei lavoratori dai rischi di esposizione a campi elettromagnetici, in vigore dal 01/07/2016;
- il titolo VIII, capo V - Protezione dei lavoratori dai rischi di esposizione a radiazioni ottiche artificiali, in vigore dal 26/04/2010.
Ad integrare le disposizioni contenute nel presente D. Leg.vo 81/2008 resta operativo il disposto normativo del DPR 302/1956.

A partire dal 15/05/2008 sono dunque abrogate dal nuovo T.U. le seguenti disposizioni:
- DPR 547/1955;
- DPR 164/1956;
- DPR 303/1956, ad eccezione dell'art. 64;
- D. Leg.vo 277/1991;
- D. Leg.vo 626/1994, ad eccezione delle disposizioni attuative dell'art. 1, comma 2, riguardanti in generale gli organi con compiti in materia di ordine e sicurezza pubblica, le università, le rappresentanze diplomatiche e consolari, i mezzi di trasporto aerei e marittimi, in vigore fino al 15.5.2009, data limite entro cui è prevista l'emanazione di appositi decreti ministeriali;
- D. Leg.vo 493/1996;
- D. Leg.vo 494/1996;
- D. Leg.vo 187/2005;
- Art. 36-bis, commi 1 e 2 della L. 248/2006;
- Artt. 2, 3, 5, 6 e 7 della L. 123/2007.

Sono previsti ulteriori decreti integrativi che provvederanno ad armonizzare la nuova normativa con quella recante riferimenti alle disposizioni abrogate dal decreto in commento; fino all'emanazione di tali decreti, ogni rinvio alle norme abrogate sarà da riferirsi alle corrispondenti disposizioni del D. Leg.vo 81/2008.

Il Decreto, entrato in vigore il 02/03/2024, ha adottato disposizioni relative, tra l'altro, a:
- albo dei periti presso il tribunale;
- semplificazione in materia di affidamento dei contratti pubblici PNRR;
- semplificazione procedure affidamento già avviate per interventi definanziati dal PNRR;
- procedimenti di VIA;
- sistema di qualificazione delle imprese e dei lavoratori autonomi (c.d. “patente a crediti”);
- verifica della congruità dell’incidenza della manodopera per appalti pubblici e privati di realizzazione dei lavori edili;
- benefici normativi e contributivi previsti dalla normativa in materia di lavoro e legislazione sociale;
- realizzazione di interventi volti a fronteggiare il rischio di alluvione e il rischio idrogeologico;
- verifiche da parte dell’Ispettorato nazionale del lavoro e iscrizione alla lista di conformità INL;
- rigenerazione urbana;
- credito d'imposta per transizione digitale ed energetica delle imprese;
- riduzione tempi di pagamento da parte della PA;
- modalità semplificate della verifica preventiva interesse archeologico;
- procedura semplificata per installazione di colonnine di ricarica elettrica.